Kann ich auch am 2. Tag der Immunhistochemie den Block der endogenen Peroxidase durchführen?
Hi, ich mache gerade eine IHC. Blöderweise habe ich vor dem Blocken den Schritt vergessen, bei dem man mit Methanol und H2O2 die endogene Peroxidase in Gewebe blockiert. Ich habe jetzt den Primärantikörper schon über Nacht drauf. Könnt ihr mir sagen, ob das schlimm ist bzw. ob ich das Inkubieren in 3% H2O2 und Methanol auch am 2. Tag der Färbung machen kann (zum Beispiel bevor ich den Sekundärantikörper drauf tue)?
1 Antwort
Erythrozyten, Granulozyten, Monozyten und Muskelgewebe färben sich zum Teil unspezifisch an, wenn die Aktivität der endogenen Peroxidase nicht vollständig blockiert wird.
Wenn ich das Verfahren richtig verstanden habe, sollte es möglich sein, nach dem Aufbringen des prim. Antikörpers die endogene Peroxidase zu blockieren, da die eigentliche Färbung erst später stattfindet. Aber da ich keine ausreichender Erfahrung auf diesem Gebiet habe, schlage ich vor, einen Tutor oder den Dozenten zu fragen.