Wie kann man feststellen ob die Fremd DNA in das Plasmid eingebaut wurde?
Kann mir bitte jemand helfen?
Das ist die Aufgabe
2 Antworten
Die Aufgabenstellung ist ein wenig knapp beschrieben, deshalb kann ich dir nicht genau sagen, ob meine Antwort hilfreich sein wird.
Im Grunde koppelt man die Fremd-DNA mit einem einem Genabschnitt der für einen bestimmten Marker kodiert. Bspw. Antibiotikaresistenz.
Wenn man nun die Bakterien, in welchen die Plasmide vorhanden sind kultiviert und Antibiotika beigibt kann man 2 mögliche Situationen vorfinden:
- Bakterien wachsen nicht. D.h. die Fremd-DNA wurde nicht in das Plasmid eingebaut, da die Bakterien ansonsten resistent gegen das Antibiotikum sein müssten.
- Bakterien wachsen trotz Antibiotika. D.h. die Fremd-DNA wurde in das Plasmid eingebaut, da nur so eine Antibiotikumresistenz möglich sein kann.
Daneben gibt es aber noch weitere Möglichkeiten.
Eben dann ist mein Antwort genau das, was du für deine Aufgabe brauchst. Das Gen für die Ampicillin-Resistenz wurde durch die Ligase zerschnitten, d.h. es funktioniert nicht mehr! Falls also Fremd-DNA ins Plasmid eingebaut wurde sind sie nicht mehr resistent gegen Ampicillin.
Sie sollte vorher markiert sein.
Welche Genexprimierungen kommen nun hinzu, woran man das erkennen kann?
Ich habe ein Foto hinzugefügt